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沉香树苗的培育也能通过组培技术实现
2016-06-08 13:23

  
  沉香树, 学名[ Aquilaria sinensis (Lour .G ilg], 又名白木香 、土沉香 ,属于瑞香科(Thymelaeaceae)。是一种热带及亚热带常绿乔木, 高6~20 m , 胸径50 ~ 90cm , 主要分布于广东、广西、云南、福建等省区, 沉香树含树脂的木材带有香气,以带黑色树脂的干燥心材入药,药材名沉香 , 为国产沉香的正品来源, 广东地道药材,十大广药之一。沉香是临床常用的理气药,具行气止痛、温中止嗳 、纳气平喘功效 , 用于治疗胸腹胀痛、胃寒嗳吐、虚喘等症。另外,沉香树又是很好的园林绿化树种 , 可栽植于城市街道两旁、办公楼周围 、居住小区、庭院等地方 , 可净化空气 , 美化环境,有益健康,特别在提倡“创建保健型园林”的今天 ,沉香树将有更好的应用前景。但近年来 , 由于沉香树自然繁殖率低 、生存环境的破坏 、虫害及人为掠夺式砍伐等原因 , 使沉香树资源遭到严重的破坏 ,现仅有零星散生的残存植株。1987 年沉香树被列为国家珍稀濒危三级保护植物 ,1999 年又被国务院批准为国家二级重点保护野生植物 。结合引进开发,对该植物进行组织培养快速繁殖技术研究并获得成功 ,现将有关研究结果报道如下 。


  1、材料与方法


  1.1  材料来源材料为半年生的沉香树种子苗优株,由广东省电白县农委提供 。


  1.2  研究方法从筛选的沉香树种子苗优株剪取生长健壮的枝条, 去除叶片 ,用自来水冲洗约 30min , 在超净工作台上按以下程序进行表面消毒处理:75 %酒浸泡 30 s , 接着用 0.1 %升汞液浸泡 7 min , 最后用无菌水冲洗 5 ~ 6次 , 用无菌吸水纸吸干后 , 切去与药液直接接触的伤口部分 , 将枝条切成 1.5 ~ 2.5 cm 长的枝段(带 1 ~ 2 个叶芽)备用。基本培养基为 MS 培养基 ,附 加 3 % 蔗 糖 ,0 .6 %卡拉胶及不同浓度配比的激素, 调至 pH5 .8 , 培养温度控制在 25±2, 光照 时 间 10 h/ d ,光 照 强 度2 000-3 000 lx 。


  2、结果与分析


  2 .1   沉香树外殖体接种于不同培养基的表现情况为了了解培养基不同组成成分在沉香树外殖体中的诱导作用 ,找出适合的培养基组合方式 , 设计了以下实验(表 1), 每个处理接种 40 个枝段 , 设置 4 个重复 ,每重复 10 个枝段 , 基本培养基为 1/ 2MS 。外植体接种 7d 叶芽开始萌动抽长 , 20d 后大部分基部膨大 , 35d 统计外植体芽的诱导率 , 结果见表 1 。


  由表 1 可以看出 , 培养基中添加不同浓度的 6BA , 外植体的诱导率不同 。表现为随浓度升高而降低 , 外植体诱导出芽的情况则随 6BA 浓度的升高而逐渐表现不正常 , 出现玻璃化现象。 从整体来看 , 浓度为 0 .2 mg/L6BA 的 1 号培养基和浓度为 1.0 mg/ L6BA 的 2 号培养基诱导率分别为 85 %和 52 %, 外植体叶芽表现分别为正常和短小 ;而 3 号培养基和 4 号培养基随着 6BA浓度的升高而出现玻璃化的现象 。因此 , 选择平均诱导率为 85 %的 1 号培养基作为不定芽诱导培养基比较合适 。


  2 .2  不同培养基对沉香树苗芽增殖的影响将诱导出的叶芽分 割 ,继续在 1/2MS +6BA 0.2mg/ L +N AA0 .01mg/ L 进行增殖一段时间后 , 再在表2 设计的培养基进行继代增殖试验 , 每一处理接 30芽, 设置 3 个 重 复 , 每重 复 10 芽 , 基 本 培 养 基 为2/3MS , 40d 统计增殖率 。结果见表 2 。由表 2 可以看出, 添加不同浓度的生长素 6BA 及 LH(水解乳蛋白)对沉香树芽增长有重大影响 , 不添加 LH 的 8 号培养基与添加 LH 的 5 号培养基的芽增殖率分别是 1.6 倍和 2.1 倍 , 因此 ,添加 LH 能提高芽的增殖率 。在培养基添加 LH2 mg/ L 的水平上 , 芽平均增殖率随 6BA 浓度的升高而降低 , 故可选择增殖率较高 , 芽生长正常的5 号培养基作为芽增殖继代培养基 。


  2.3  生长素 IBA 、N AA 对沉香树不定芽生根的影响将在继代增殖培养基上长至 2 .0 ~ 3 .0cm 的沉香树芽切下接种于以下生根培养基上(见表 3), 诱导生根的基本培养基为 1/ 3 MS , 再添加不同浓度的 IBA 和NA A , 共 4 种处理 , 每一处理接 30 芽 , 设置 3 个重复 ,每重复 10 个芽 , 50d 统计生根率 , 结果见表 3 。


  从表 3 的结果显示 , NA A 对接种的芽诱导不定根、根数和根长的效果比 IBA 明显 , 生根率随浓度升高而降低 , NAA 浓度为 0 .2 mg/ L 的 9 号培养基生根率为 75%, 根粗壮 ,长且根数比较多 ,浓度为 1.0 mg/ L 的10 号培养基生根率为 56%, 根粗壮 , 但比较短小 , 且基部长愈伤组织 。而 IBA 浓度为 0.2 mg/ L 的 11 号培养基, 根比较少 , 且细长 , 浓度为 1 .0 mg/ L 的 12 号培养基, 根虽然比较多 , 粗壮 , 但短, 而且基部长愈伤组织。因此 , 选择生根率比较高 , 有一定根数且根表现生长正常的 9 号培养基做为芽诱导不定根的生根培养基较好 。


  2 .4  栽培基质对沉香树组培苗移栽成活率的影响组培苗的移栽是组培快繁中最后也是最关键的一步 。组培苗经过生根培养 , 长根后 , 可以进行移栽 。移栽前应先炼苗 7 ~ 10 d , 然后取出小苗洗净粘附的卡拉胶 , 再用 1 000 倍甲基托布津浸泡 5 min 后 ,种植在经消毒过的基质 , 棚内要求空气湿度 80 %~ 90 %, 50d 统计小苗移栽成活率, 结果见表 4 。由表 4 可看出 , 不同的栽培基质对沉香树组培苗移栽成活率及苗的生长影响比较大 。泥炭土/河沙(2 ?1)的基质移栽成活率最高 , 达到 82%, 而且 12d 芽长高 , 16d 根伸长, 表现芽长高 , 根伸长快 。其他基质相对而言移栽成活率比较低 ,芽长高及根伸长也比较慢 。因此可选用泥炭土/河沙(2?1)做为沉香树组培苗移栽基质。


  3  结论与讨论


  (1)沉香树组培快繁中 , 各阶段适宜的培养基 :


  不定芽诱导培养基 :1/ 2MS + 6BA 0.2mg/ L +NAA0 .01mg/ L ;2芽的 继代 增殖 培养 基 :2/ 3MS +6BA0 .2mg/ L +LH2mg/ L ;3生根培 养基 :1/ 3MS +NAA0 .2mg/ L 。


  (2)6BA 的浓度及 LH 对沉香树增殖起着重要的作用。低浓度的 6BA 可提高沉香树芽的增殖率。相反, 高浓度的 6BA 则对芽的增殖产生抑制作用, 且对产生的芽有毒害作用, 表现为玻璃化和基部不正常的膨大。而 LH 可提高芽的增殖率 。


  (3)生长素 IBA 、N AA 对沉香树组培苗生根的影响不同 。其中芽苗对 NA A 的反应比较敏感 , 生根率比较高 ;而对 IBA 反应则相对比较迟钝 ,生根率不高 。


  (4)基质的正确选择是组培苗移栽成活的关键。选择疏松、透气、排水容易, 并有一定的保肥、保水能力的泥炭土与河沙(2/1)混合配成的基质可提高沉香树试管苗移栽成活率 , 并使其提早生长 , 以达到降低成本 、培育壮苗的目的。


  从试验中可以证明,利用组培技术来培育沉香树苗也是可以的,但是这个实用性并不是很强,由于沉香种子繁殖能力高,现在我们推荐培育苗种多是选择优质的沉香种子来进行繁殖,更能达到好的效果。


 

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